TOV112D细胞株（人上皮性卵巢癌细胞株）

TOV112D细胞是来源于人上皮性卵巢癌的细胞系，用于研究卵巢癌的病理机制和进行药物筛选。TOV112D细胞株最初于1992年10月从一名42岁的女性患者中分离出来，患者患有早发性恶性卵巢腺癌。分离工作由美国加利福尼亚大学洛杉矶分校（UCLA）的Shin Imai博士团队完成。

TOV-112D细胞系的染色体核型显示为52，XX，具有多种染色体的加倍或增加，例如X染色体的增加、1号和22号染色体的增加，以及多个染色体的复制。TOV-112D细胞系是研究卵巢癌的重要工具，尤其在病理研究和新药开发中具有广泛应用。

TOV112D细胞株特性特征

• 致瘤性：TOV112D细胞在裸鼠体内表现出致瘤性，能够形成肿瘤。
  

• 集落形成：在软琼脂培养基中能够形成集落，显示出TOV112D肿瘤细胞的特性。

• HER2/neu：阳性，表明TOV112D细胞系可能对某些靶向治疗敏感。
  

• p53：存在突变（突变，Arg-->His外显子6密码子175突变），TOV112D细胞在肿瘤发生中可能存在p53通路的异常。

• 角蛋白表达：TOV112D细胞系表达角蛋白，进一步支持其上皮细胞的特性。
  

• 与TOV-21G和OV-90细胞系相比，TOV-112D细胞系在3p24染色体上没有缺失，显示出其独特的基因组特征
  

TOV112D细胞株参数表

TOV112D人上皮性卵巢癌细胞株培养教程

TOV112D细胞复苏

• 取出TOV112D细胞冻存管，迅速放入37°C的水浴中解冻，轻轻摇晃冻存管，以确保均匀解冻，直至TOV112D细胞完全液化（约1-2分钟）。
  

• 将解冻后的TOV112D细胞悬液迅速转移至15 mL离心管中，加入4 mL预热至37°C的DMEM高糖培养基，轻轻混匀以稀释DMSO。

• 在1000 rpm离心3分钟，弃去上清液。

• 加入1-2 mL新鲜的DMEM培养基，轻轻吹打以重悬TOV112D细胞沉淀。

• 将重悬后的TOV112D细胞悬液转移至10 cm培养皿中，加入约8 mL DMEM培养基，并将其放置在37°C、5% CO2的培养箱中过夜培养。

TOV112D细胞传代

• 当TOV112D细胞达到80%-90%的汇合度时，可进行传代操作。
  

• 弃去培养瓶中的培养基，用PBS缓冲液洗涤TOV112D细胞1-2次，以去除残留的培养基成分。

• 向培养瓶中加入1 mL 0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液，确保覆盖TOV112D细胞单层，随后弃去多余消化液。

• 将培养瓶放入37°C培养箱中消化1分钟左右，观察TOV112D细胞是否开始变圆并逐渐脱落。

• 当大部分TOV112D细胞脱落时，立即取出培养瓶，加入等量的DMEM培养基中和胰酶。

• 轻轻吹打培养瓶底部，使TOV112D细胞完全脱落并均匀悬浮。

• 将TOV112D细胞悬液转移至离心管中，1000 rpm离心3分钟，弃去上清液。

• 加入适量新鲜DMEM培养基重悬TOV112D细胞，按适当比例（通常为1:3至1:5）分装至新的培养瓶中，继续培养。

提高TOV112D细胞转染效率的策略

• 选择合适的转染试剂：使用专为贴壁细胞设计的高效转染试剂，如Lipofectamine 2000、JetPEI或Fugene HD。这些试剂通常能显著提高TOV112D细胞的转染效率。

• 细胞密度：确保TOV112D细胞在转染前密度在70%-90%之间，这样能优化细胞的转染效率。
  

• 转染时间：根据转染试剂的使用说明，优化TOV112D细胞的转染时间。通常转染时间为4-24小时，应根据实验需求进行调整。

• 培养基选择：在转染过程中使用无血清培养基，以减少血清对TOV112D细胞转染效率的干扰。转染完成后24小时内更换为含血清的培养基。

• 增加DNA或RNA的用量：根据实验需求，优化核酸浓度。质粒DNA或siRNA的浓度可在0.5-5 µg/mL范围内调整，以提高TOV112D细胞的转染效率。

• 采用电转染技术：如果实验条件允许，电转染（如使用Nucleofector）是一种有效提高TOV112D细胞转染效率的技术，尤其适用于难以转染的细胞系。

• 监测TOV112D细胞转染效果：在转染质粒中加入报告基因（如GFP或Luciferase），以便于监测TOV112D细胞的转染效率和活力，及时调整实验条件。

• 细胞预处理：在转染前对TOV112D细胞进行短暂的预处理（如使用低浓度的胰酶处理）可以提高细胞膜的通透性，从而提高转染效率。

• 优化TOV112D细胞的培养条件：确保TOV112D细胞处于最佳状态下生长，包括适当的温度、CO2浓度和湿度等，以提高细胞活力和转染效率。

• 反复优化：通过多次实验，逐步优化各个参数，记录TOV112D细胞的实验结果，最终找到最佳的转染条件。