RS1细胞（大鼠皮肤成纤维细胞系）

大鼠皮肤成纤维样细胞（RS1，Rat skin 1）源自一只大鼠的皮肤组织，通过原代培养并持续传代后建立为稳定细胞系。2007年由中国科学院昆明细胞库完成建系并存档，随后被国内多个科研细胞资源中心保存。

RS1细胞呈典型的成纤维样结构，常见细胞长梭形、稍具不规则延伸，胞核多为椭圆形。rs1细胞贴壁牢固，在培养皿中可形成旋涡状或束状排列。其生长速度较，依赖血清，在标准培养体系（37°C、5% CO₂）下可稳定扩增，适合常规实验操作。

RS1细胞特性特征

• 典型成纤维样贴壁细胞，梭形或长梭形，核椭圆，rs1细胞培养中常呈束状或旋涡样排列。

• rs1细胞稳定表达 Vimentin、Fibronectin、Collagen I/III 等，是皮肤 ECM 的主要生产细胞。

• 在 TGF-β1 等刺激下可诱导 α-SMA（ACTA2）、CTGF 上调，表现出纤维化反应中的典型激活表型。

• rs1细胞分泌胶原、层粘连蛋白等基质成分，可模拟皮肤组织的基质重塑过程。

• 调控胶原合成、ECM 沉积和成纤维细胞活化，是瘢痕与皮肤纤维化研究的核心信号轴。

• 典型高表达基因：COL1A1、COL3A1、FN1、PAI-1、CTGF 等，rs1细胞常作为其 ECM 与修复功能的代表性指标。

• rs1细胞可诱导 p16、p21、p53、IL-6、MMPs 等基因的表达，用于模拟皮肤衰老及炎症响应。

• miR-29 家族、miR-181a-5p 等在调控 ECM 生物合成、细胞衰老和凋亡中具有重要作用，常用于 gain/loss 功能研究。

• rs1细胞能清晰反映 miRNA-TGF-β、miRNA-胶原轴等。

• rs1细胞是研究皮肤修复、纤维化、瘢痕形成、 ECM 重塑、细胞衰老、炎症反应的可靠体外模型。

• rs1细胞生长稳定、批次重复性好，适用于药物筛选、材料相容性评价以及纤维化相关通路的分子机制研究

RS1大鼠皮肤成纤维细胞系参数表

RS1大鼠皮肤成纤维细胞系培养教程

传代方法

• 当 rs1细胞 达到约 80–90% 融合度 时应及时传代，以避免过度接触抑制：

• 去除旧培养基，PBS 轻洗 1 次。

• 加入少量 0.25% Trypsin-EDTA，室温或 37℃ 消化 1–2 分钟。

• 待 rs1细胞 较松散但未完全脱落时轻敲瓶壁使其脱离。

• 加入等体积含血清培养基终止消化。

• 1:2 或 1:3 比例分瓶，根据生长速度调整密度。

• 成纤维类细胞对接触刺激较为敏感，因此消化过程中需避免长时间暴露于胰酶。

冻存与复苏

• 为了保持 rs1细胞 的遗传稳定性，应在传代数不高时进行冻存：

• 冻存液组成：90% FBS + 10% DMSO

• 细胞状态：生长旺盛、污染检测阴性

• 冻存程序：逐级降温至 −80℃，再转入液氮长期保存

• 复苏时应快速融化并立即置入预热培养基中，以提高 rs1细胞 的存活率。

形态与生物学表现监测

• 在培养过程中，需定期观察 rs1细胞 的状态，以确保实验结果可靠：

• 正常形态：梭形、细长、贴壁牢固

• 整体排列：可呈束状或旋涡状

• 紧张纤维明显，细胞伸展性佳

• 若出现圆形化、脱落或增殖减缓，需检查血清质量、pH、污染等因素

注意事项

• 避免超过 20–25 代的长期连续传代，以防 rs1细胞 出现衰老或表达漂移。

• 传代操作需轻柔，强力吹打会破坏其纤维结构。

• 建议定期进行微生物检测，尤其是支原体检测，以保证 rs1细胞 行为一致性。