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货号：STM-CE-2005 规格：5×10⁵cells/T25细胞培养瓶
原代小鼠表皮角化细胞
- 来源：皮肤组织
- 细胞特征：贴壁 ，上皮细胞样
- 培养基：原代上皮细胞专用培养基
- 其他：角质形成细胞是一种不断分化的复层鳞状上皮细胞，其分化的最终阶段是形成角蛋白
小鼠表皮角质形成细胞来源于皮肤组织，具有合成角质蛋白的功能。
角质形成细胞是表皮的主要细胞成分，起始于表皮深层并逐渐增殖、分化。在角化过程中，角质形成细胞的细胞核和细胞器会完全消失，细胞失去生理功能并最终脱落。
小鼠表皮角质形成细胞特征
表皮位于动物皮肤的外层，由胚胎时期外胚层形成，具有抗摩擦和抗损伤的作用。
表皮由复层扁平上皮构成，从基底层到表面可分为五层，包括基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。
表皮角质形成细胞是一种能合成角质蛋白的上皮细胞，为表皮的主体，从表皮深层开始逐渐增殖、分化。
角质形成细胞在角化过程中，细胞核与细胞器完全消失，细胞失去生理功能并脱落。
表皮角质形成细胞主要分布于表皮基底层，随着细胞程序性死亡后，细胞向表皮产生角化并移动。
角质形成细胞最终产生角质蛋白，在角化过程中，一般可分为四层：基底层、棘层、颗粒层和角质层。
角质形成细胞分化成熟表现为从基底层向角质层的逐渐移行。
些部位，特别是掌跖部位，角质层下方还可见到透明层。
小鼠表皮角质形成细胞参数表
| 产品名称 | 小鼠表皮角质形成细胞(原代细胞) |
| 组织来源 | 皮肤组织 |
| 产品规格 | 5×10⁵ cells/T25 细胞培养瓶 |
| 细胞简介 | 小鼠表皮角质形成细胞分离自皮肤组织。 |
| 包被条件 | 鼠尾胶原Ⅰ(2-5 μg/cm²) |
| 培养基 | 含 FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin 等 |
| 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 传代特性 | 可传1-2代 |
| 传代比例 | 1:02 |
| 消化液 | 0.25% 胰蛋白酶 |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；CO₂，5% |
| 细胞特性 | 角质形成细胞是一种不断分化的复层鳞状上皮细胞，其分化的最终阶段是形成角蛋白。 |
| 质量检测 | 经 PCK 免疫荧光鉴定，细胞纯度可达 90%以上 且不含 HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。 |
培养教程
小鼠表皮角质形成细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈上皮细胞样。在标准操作流程下，细胞可传1-2代。
初次处理
从包装中取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身。
拆下封口膜，放入37℃、5%CO₂、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4小时，以稳定细胞状态。
贴壁细胞消化
吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次。
添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3分钟；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5mL完全培养基终止消化。
用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO₂、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
细胞收货脱落
收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5分钟，保留沉淀。
添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3分钟（或4℃冰箱静置5-7分钟）；消化完向离心管内加入5mL完全培养基终止消化。
经1000rpm离心5分钟，丢弃上清，用5mL完全培养基（补加1%FBS，促进贴壁）重悬沉淀，接种于新的培养瓶内。
待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基（37℃预热）。
细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm²）、多聚赖氨酸PLL（0.1mg/mL）、明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项
培养基在4℃条件下可保存3-6个月。
在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通。
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