细胞培养基的补充成分

一些细胞系推荐使用的完整生长培养基需要添加基础培养基和血清中没有的成分。这些成分包括维持增殖和维持正常细胞代谢的激素、生长因子和信号物质。
补充剂通常在无血清培养基中制备成 100 倍(或更高)的原液。一些补充剂可能需要先溶解在溶剂中,然后再在无血清培养基中稀释至原液浓度。原液浓度应分装成小体积并储存在适当的温度下;大多数原液浓度可在 –80°C 下储存,但在储存前请咨询您的供应商。
添加补充剂会改变完全生长培养基的最终渗透压,这可能会对培养细胞的生长产生负面影响。最好在添加少量补充剂原液后重新检查完全生长培养基的渗透压;大多数脊椎动物细胞系的最佳渗透压应在 260 mOSM/kg 和 320 mOSM/kg 之间。
在基础培养基中添加补充剂后,应根据具体情况确定完全生长培养基的保质期。含有蛋白质补充剂(例如表皮生长因子、牛血清白蛋白等)的完全培养基往往比单独的基础培养基降解得更快。大多数完全生长培养基可以分装在 2°C 至 8°C 下保存约一个月。但是,如果任何补充剂预计在一个月期限之前过期,则完全生长培养基的保质期也应如此。某些要求严格的细胞系可能要求在使用前立即添加成分。不要冷冻完全生长培养基。在 –70°C 或以下冷冻细胞培养基会导致一些生长因子和/或维生素从溶液中沉淀出来。即使加热到 37°C,解冻后也很难让这些成分重新回到溶液中。 建议将培养基存放在 2°C 至 8°C 之间,远离光线。
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